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產品名稱:小鼠Smad 酶聯免疫elisa試劑盒規格
英文名稱: Smad ELISA Kit
規格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。
類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。
技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
人磷酯酶Cγ鏈(PLCγ)ELISA試劑盒 英文名稱: Human Phospholipase Cγ,PLCγ ELISA Kit 規格: 96T/48T 人CCAAT增強子結合蛋白α(C/EBPα)ELISA Kit,48T/96T 進口/原裝
人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA試劑盒 英文名稱: Human targeted ribonuclease, TR ELISA Kit 規格: 96T/48T 兔子B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA Kit,48T/96T *
人甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒 英文名稱: Human Methylase ELISA Kit 規格: 96T/48T 大鼠妊相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA Kit,48T/96T 進口/原裝
人α肌動蛋白(α Actin)ELISA試劑盒 英文名稱: Human Alpha-Actin,α Actin ELISA Kit 規格: 96T/48T 牛α酸性糖蛋白(α-AGP)ELISA Kit,48T/96T *
人REST協阻抑因子3(RCOR3)ELISA試劑盒 英文名稱: human REST corepressor 3,RCOR3 ELISA Kit 規格: 96T/48T 兔子C反應蛋白(CRP)ELISA Kit,48T/96T 進口/原裝
人特異性巨噬細胞武裝因子(SMAF)ELISA試劑盒 英文名稱: Human Specifie Macrophage Arming Paetot,SMAF ELISA Kit 規格: 96T/48T 兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA Kit,48T/96T *
人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒 英文名稱: Human eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit 規格: 96T/48T 裸鼠克拉拉細胞蛋白(CC6) ELISA Kit,48T/96T 進口/原裝
輕鏈lambda(λ-IgLC)ELISA試劑盒 英文名稱: Human lambda immunoglobulin light chain,λ-IgLC ELISA Kit 規格: 96T/48T 人抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb) ELISA Kit,48T/96T *Scavenger Receptor BII 清道夫受體B2抗體 0.2ml NRSF/REST 神經元抑制蛋白抗體 0.ml
CIDE B DNA斷裂因子相似蛋白B抗體 0.2ml phospho-P53(Ser20) 磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體 0.ml
KIF2B 有絲分裂驅動蛋白樣2B抗體 0.2ml PCNA 增殖細胞核抗原抗體 0.ml
ZWINT 著絲粒ZW0相互作用蛋白抗體 0.2ml Phospho-Pin (Ser6) 磷酸化肽基脯氨酞順反異構酶Pinl抗體 0.ml
ANKRD3A 錨蛋白重復結構域蛋白3A抗體 0.2ml Phospho-PKR (Thr45) 磷酸化蛋白激酶R抗體 0.ml
ARRDC3 抑制蛋白結構域蛋白3抗體 0.2ml phospho-c-Raf(Ser338/Tyr340) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 0.ml
COMMD3 銅代謝結構域蛋白3抗體 0.2ml S00A8 S00鈣結合蛋白A8抗體 0.ml
Phospho-CRMP2 (Thr54+Ser58) 磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體 0.ml SLT/SLT-IIe/O39 豬水腫素(O39)菌體蛋白抗體 0.2ml
ROC/RNF75 環指蛋白75抗體 0.2ml phospho-STAT3 (Ser727) 磷酸化信號轉導和轉錄激活因子3抗體 0.ml
Hairless 無毛發蛋白抗體 0.2ml TTX(5E7) 河豚單克隆抗體 ml