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小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存

小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存

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小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存 詳細(xì)資料

小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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產(chǎn)品名稱:
英文名稱:Mouse rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時(shí)檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床 。

類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

對甲胺藍(lán)(BCIP)    英文名稱:    Toluidineblue(BCIP)    :    6578/6/9    分子式:    433.62    分子量:    C8H6BrCINO4PC7H9N
對甲酚    英文名稱:    Paracresol    :    06-44-5    分子式:    08.4    分子量:    C7H8O
對甲磺酸2,6-二甲吡鎓鹽    分子式:    279.35    分子量:    C4H7NO3S    英文名稱:    P-toluenesulfonicacid2,6-twomethylpyridiniumsalt    :    76h
對甲磺酰    分子式:    86.23    分子量:    C7H0N2O2S;CH3C6H    英文名稱:    Paratoluenesulfonicacid    :    576-35-8
對甲氧甲酰    分子式:    66.8    分子量:    C8H0N2O2    英文名稱:    Onthemethylgroupofthe    :    3290-99-
對甲氧偶氮    分子式:    22.25    分子量:    C3H2N2O    英文名稱:    Onmethoxyazobenzene    :    2396-60-3
對克利西丁--對磺偶合劑    英文名稱:    ToCliffordXiding-p-aminobenzenesulfonatecouplers    :    40947-69-    分子式:    32.35    分子量:    C4H5N3O4S
對氯芐并咪唑    分子式:    242.7    分子量:    C4HClN2    英文名稱:    P-chlorobenzylbenzimidazole    :    5468-66-6
對氯碘    分子式:    238.45    分子量:    C6H4ClI    英文名稱:    Thechlorineiodobenzene    :    637-87-6
對氯酚    英文名稱:    Parachlorophenol    :    06-48-9    分子式:    28.56    分子量:    C6H5OCl
對氯甲    英文名稱:    Chlorinetoluene    :    06-43-4    分子式:    26.59    分子量:    C7H7Cl
對氯甲并噁唑    分子式:    243.69    分子量:    C4H0ClNO    英文名稱:    Thechloromethylphenylbenzoxazole    :    57864-9-4
對氯三氟甲    分子式:    80.6    分子量:    C7H4ClF3    英文名稱:    Tothreef    :    98-56-6
對氯三氟甲氧    分子式:    96.55    分子量:    C7H4ClF3O    英文名稱:    Onthechlorinethree    :    46-8-4免疫蛋白清除劑    20 次    
*0 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞    0.mL×0    
山羊抗小鼠 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記    00 μL    
抗Ⅲ,0mg/mL    mL    
葡聚糖 T-40    0g    
DNA  Sarkosyl( 十二烷基肌氨酸 )    00g    
阿拉伯樹膠粉    00g    
TE 緩沖液,PH7.0    0mL    
    g    
山羊抗兔 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標(biāo)記    000μL    
L- 乳酸脫氫酶 ( 兔肌 )    2.5ku    
DTT,免稱量蛋白    48 管    
2-262    Y089 菌種    mL

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測酶聯(lián)免疫 rudimental bovine 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒
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