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產品名稱:小鼠高爾基蛋白73(GP-73)酶聯免疫elisa試劑盒規格
英文名稱: GP-73 ELISA Kit
規格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。
小鼠高爾基蛋白73(GP-73)酶聯免疫elisa試劑盒規格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠高爾基蛋白73(GP-73)酶聯免疫elisa試劑盒規格標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。
小鼠高爾基蛋白73(GP-73)酶聯免疫elisa試劑盒規格技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
5'-溴間三聯 分子式: 309.2 分子量: C8H3Br 英文名稱: 5'-three. : 03068-20-8
5-溴喹啉 分子式: 208.06 分子量: C9H6BrN 英文名稱: 5-bromide : 4964-7-0
5-溴尿嘧 分子式: 90.98 分子量: C4H3BrN2O2 英文名稱: 5-bromouracil : 5-20-7
5-溴噻唑 分子式: 64.02 分子量: C3H2BrNS 英文名稱: 5-thiazolebromide : 3034-55-7
5-溴水醛 英文名稱: 5-bromosalicylaldehyde : 76-6- 分子式: 20.02 分子量: C7H5BrO2
5-溴異喹啉 分子式: 26.04 分子量: C6H6BrN3O 英文名稱: 5-bromide : 34784-04-8
5-亞硝-2,4,6-三嘧 分子式: 54.3 分子量: C4H6N6O 英文名稱: 5-nitroso-2,4,6-threeaminopyrimidines : 006-23-
5-亞硝-8-羥喹啉 分子式: 74.6 分子量: C9H6N2O2 英文名稱: 5-nitroso-8-hydroxyquinoline : 3565-26-2
5-乙-2-吡乙 分子式: 5.2 分子量: C9H3NO 英文名稱: 5-ethyl-2-pyridineethanol : 5223/6/3
5-乙硫四氮唑 分子式: 30.7 分子量: C3H6N4S 英文名稱: 5-ethylthiotetrazoline : 89797-68-2
5-乙尿嘧 分子式: 40.4 分子量: C6H8N2O2 英文名稱: 5-ethyluracil : 422-49-
5-乙酰-2-甲吡 分子式: 35.636 分子量: C8H9NO 英文名稱: 5-acetyl-2- : 36357-38-7
5-乙酰-2-溴吡 分子式: 200.04 分子量: C7H6BrNO 英文名稱: 5-acetyl-2- : 39042-59-4
5-乙酰乙酰并咪唑酮 英文名稱: 5-acetamidobenzimidazolone : 26576-46-5 分子式: 233.22 分子量: CHN3O3
5-異丙-2-嘧 分子式: 37.8 分子量: C7HN3 英文名稱: 5--2-aminogroup : 98432-7-8四氧嘧啶 5g
S-Methyl-ITU.sulfate(iN0S 抑制劑 ) 50mg
膽酸 5g
Dansyl chloride 00mg
測試盒 48 T
Bst DNA 聚合酶,全長 500U
酸性品紅 5g
小鼠高爾基蛋白73(GP-73)酶聯免疫elisa試劑盒規格小鼠抗 CBP 標簽單抗 00μL
細菌總蛋白質微量提取試劑盒 30 次
Protein G 瓊脂糖 mL
HRP 標記內參抗體 (β-actin) 20μL
9-0040-00 DMEM 培養基 ( 高糖,含 0% 胎牛血清 ) 00mL
330G-00 真菌種屬鑒定 PCR Mix 7 00 次
7-002-500 .5 mL RNase-free 離心管 500 支