細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

JVM-2 人淋巴癌細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞別稱；

種屬來源；人

組織來源；淋巴瘤

生長特性；懸浮生長

細(xì)胞形態(tài)；淋巴母細(xì)胞

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景簡介；該細(xì)胞是 J.V.Melo從一位６３歲患有套細(xì)胞淋巴瘤白人女性外周血中分離建立的，經(jīng)EBV介導(dǎo)獲得永生化，該細(xì)胞表達(dá)p１６和細(xì)胞周期蛋白D２,低水平表達(dá)細(xì)胞周期蛋白D１。

生物安全等級；1

細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測；無

培養(yǎng)基；RPMI-1640+10% FBS+PS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠層粘連蛋白(Laminin)檢測試劑盒 ，英文名： Laminin ELISA Kit

Mouse macrophage derived chemokine (MDC/CCL22) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)檢測試劑盒

Mousethioredoxieductase,xRELISAKit 小鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanox-LDLELISAKit人氧化低密度脂蛋白

同位素核酸(PCR產(chǎn)物)蛋白結(jié)合DNA酶足跡法分析試劑盒10次

ELISAKitLFA-3/CD58大鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3

ENG重組人 Endoglin / CD105 / ENG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

去唾液酸糖蛋白受體1(ASGPR1)重組蛋白 Recombinant Asialoglycoprotein Receptor 1 (ASGR1)

STMN1重組人 STMN1 / Stathmin 1 蛋白 Protein

EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

NA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Hubei/2011) 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

去唾液酸糖蛋白受體1(ASGPR1)重組蛋白 Recombinant Asialoglycoprotein Receptor 1 (ASGR1)

EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

ENG重組人 Endoglin / CD105 / ENG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

NA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Hubei/2011) 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

STMN1重組人 STMN1 / Stathmin 1 蛋白 Protein

JVM-2 人淋巴癌細(xì)胞小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat perinuclear ai neuophil cytoplasmic aibody (pANCA) ELISA Kit 大鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)檢測試劑盒

Humanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit 人絲狀血球凝集素(FHA)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAb檢測試劑盒人抗染色體抗體(ai-chromosomeAb)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物活性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒10次

Humanα2macroglobulin,α2MGELISAKit人α2巨球蛋白(α2-MG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

中文名稱   方法   規(guī)格

小鼠促黃體激素(LH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠血管緊張素原(aGT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T