小鼠胚胎干細胞;ES-E14TG2a
本公司所有產品僅供科學實驗,不做其他科學實驗外的使用!
種屬 | 小鼠 | 規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
生長特性 | 貼壁生長 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
細胞形態 | 球形克隆細胞樣 | 編號 | GOY-01X1933 |
商品詳情:
細胞別稱;ES-E14TG2a;小鼠胚胎干細胞
種屬來源;小鼠
組織來源;胚胎
生長特性;貼壁生長
細胞形態;球形克隆細胞樣
細胞代數;10代以內
背景簡介;ES-E14TG2a細胞缺乏HGPRT(HPRT),并且對0.06 mM的6-硫有抗性。當在飼養層(胚胎成纖維細胞或STO細胞)上培養時,細胞保持未分化狀態。在沒有飼養層的情況下,細胞自發分化并形成胚胎結構。當注入胚泡中時,細胞可以進入生殖系。在常規的分子基因修飾技術之后,它們可用于重構小鼠胚胎。
細胞規格;1x106cells/T25或1mL凍存管
細胞培養操作:
1) 復蘇細胞:以下細胞培養凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養基,培養過夜)。第三天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
a、棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養瓶置于37℃培養箱中消化1 -3min(視細胞消化情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加2-3ml培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中,置于培養箱中培養。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞及細胞培養液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數。
b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養注意事項 :
一、 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象 發生請及時和我們聯系。
二、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由 客戶自行承擔。
三、用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養箱放置 2-4h。
四、貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的培養基重懸 細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。
五、 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
六、 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
七、該細胞僅供科研使用。
八、備注:運輸用的培養基 (灌液培養基) 不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培 養條件新配制的培養基來培養細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
九、 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
公司正在出售的產品:
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Mouse erythropoietin receptor (EPOR) ELISA Kit 小鼠紅細胞生成素受體(EPOR)檢測試劑盒
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streptomycin/OVA 鏈偶聯血藍蛋白 5mgstreptomycin/OVA 鏈偶聯血藍蛋白
FGF16 Protein Human 重組人 / 食蟹猴 FGF16 / FGF-16 蛋白
FKBP14重組人 FKBP14 蛋白 (His 標簽) Protein
HAVCR2 Protein Human 重組人 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 (His & Fc 標簽)
IL13RA1重組人 IL13RA1 蛋白 (His 標簽) Protein
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無內毒素質粒大量提取試劑盒 5T
Endo-freePlasmidMaxiKit 10T
無內毒素質粒小量提取試劑盒 50T
Endo-freePlasmidMiniKit 100T
MIN6(小鼠胰島瘤細胞) | CATH.a(小鼠神經細胞) | EMT6 EMT-6 (小鼠乳腺癌細胞) | Renca RenCa (小鼠腎癌細胞) |
MLO-Y4 MLOY4 (小鼠骨樣細胞) | NIT-1 (小鼠胰島素瘤β細胞) | TtT/GF (小鼠垂體促甲狀腺濾泡星狀細胞) | WEHI 164 (鼠纖維肉瘤細胞) |
LM9 (小鼠HGPRT基因缺陷型骨肉瘤細胞) | TC-1 (小鼠肺上皮細胞) | ||